Показатели качества МИБП
Идентичность. Для изучения идентичности полученного МИБП проводят исследования с использованием референс-препаратов и следующих методов: спектрофотометрии, аминокислотного анализа на содержание метионина, триптофана и цистина, анализа участков М- и С-концевой последовательности, пептидного картирования, электрофореза в полиакриламидном геле и иммуно- электрофореза, высокоэффективной жидкостной хроматографии и других методов. С их помощью удается определить конформа- ционные и другие молекулярные изменения МИБП, которые могут возникать в процессе их изготовления и хранения. Не все методы, используемые для изучения экспериментальных образцов МИБП, должны входить в нормативную документацию для установления идентичности препарата.
Стерильность. Лабораторный контроль на стерильность проводится с помощью анализа мазков и посева на стерильность. Контроль на стерильность осуществляется на разных этапах производственного процесса, в ОБТК предприятия и в Национальном органе контроля.
Стабильность. Стабильность МИБП устанавливается путем проверки его свойств через различные промежутки времени хранения и методом ускоренной термодеградации образцов вакцины при 37 °С в течение 2 нед. Относительно термостабильными препаратами являются МИБП, выпускаемые в лиофилизированном виде. После разведения лиофилизированные препараты становятся очень неустойчивыми к влиянию повышенной температуры.
Токсичность. Токсичность МИБП определяют в опытах на мышах и морских свинках. Препарат вводят по 1 и 5 человеческих доз соответственно мышам внутрибрюшинно, свинкам подкожно. Препарат считается безвредным, если у животных в течение 7 дней не снижается масса тела и не появляются какие-либо местные и общие реакции.
Пирогенность. Пирогенность МИБП определяется в опытах на 3 кроликах при внутривенном введении 1 человеческой дозы препарата. По изменению температуры тела судят об общих пироген- ных свойствах препарата. Препарат считается апирогенным, если повышение температуры от исходного уровня составляет не более 0,6 °С, а сумма индивидуальных колебаний температуры у кроликов не превышает 1,4 °С. Важным методом определения пироген- ности является тест на определение содержания эндотоксина, который позволяет определить концентрацию ЛПС в препарате.
Примеси. Идентификация примесей в МИБП может быть проведена с помощью методов иммуноблота, радиоактивного и имму- ноферментного анализа. Если не удается полностью удалить контаминирующие субстанции, необходимо установить допустимые остаточные концентрации этих веществ и доказать, что они не оказывают существенного побочного действия на организм привитого.
Для инактивации вируса и бактерий используют химические вещества (формалин, (З-пропиолактон и др.). Необходимо осуществлять контроль на полноту инактивации токсина, вирусов или бактерий и на присутствие инактиваторов в конечном продукте.
Особое внимание должно быть уделено биологическим веществам, которые используются для получения культуры клеток (трипсин) или вносятся в клеточную культуру в качестве ростовых факторов (эмбриональная телячья сыворотка и др.).
Стабилизаторы и консерванты. Стабилизаторы (гидролизат желатина, сорбит, ЛС-18идр.) и консерванты (мертиолат, 2-фенок- сиэтанол и др.) не должны подавлять активность МИБП и вызывать побочные реакции. Желатин готовят из коллагена крупного рогатого скота, его использование представляет определенный риск в отношении прионных заболеваний.
Адъюванты. Чаще всего в качестве адъювантов используют соли алюминия или кальция. Концентрация алюминия в конечном продукте не должна превышать 1,25 мг и кальция 1,3 мг на 1дозу. Адъюванты, добавляемые к вакцине, должны подвергаться распаду в организме. Каждый новый адъювант проходит тщательную лабораторную и клиническую проверку. Для носителей, включенных в состав вакцин, должна быть представлена полная характеристика структуры, состава и безопасности носителей. В конце срока хранения вакцины определяется концентрация носителя, не связанного с антигеном, которая не должна превышать установленного Национальным органом контроля лимита.
Вода, растворы, реагенты. Вода, растворы, растворители, химические вещества, используемые для приготовления МИБП, должны удовлетворять требованиям международной или национальной фармакопеи. Среда МИБП (рН) обычно соответствует 6,0-7,0. Вся лабораторная посуда и емкости, используемые для производства МИБП, должны быть изготовлены из материалов, которые совместимы с биологической субстанцией и не влияют на ее свойства.